赛默飞色谱柱色谱峰拖尾的很大一部分原因是,填料硅胶中含有金属离子杂质,在反相色谱分析中金属离子的主要影响作用方式有一下三种:
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螯环化合物与金属离子在硅胶表面的强螯合作用,使得分析中他们的分离度和灵敏度都大大下降,峰形严重拖尾;
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金属离子可以提高硅醇基的活性,使他们更偏酸性,加重了碱性化合物的拖尾,甚至可能导致峰形无法分辨;
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金属离子杂质的存在影响固定相与硅胶表面的键合强度,使固定相烷基在硅胶表面的分布不均匀,暴露的硅醇基和金属杂质离子更易于影响敏感的待测分析化合物。
所以,色谱填料硅胶中的杂质含量高低,是影响色谱峰拖尾的关键因素。
与普通填料金属杂质含量比较可以看出,其他普通填料的金属离子含量远高于液相色谱柱:
金属杂质 | Na+ | K+ |
Mg2+ |
Al3+ | Fe2+ | Ca2+ | Ti+ | Zn2+ |
CylarCol II 5C18 | 5 | 1 | 3 | 7 | 6 | 4 | 1 | 1 |
其他填料 | 37-4220 | ND | 4-64 | 20-150 | 20-303 | 6-444 | ND | ND |
赛默飞色谱柱的三种严苛测试
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